Microscopía óptica y confocal

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El SMOC permanece abierto de 8-17 solo para personal del CBMSO.

Para cualquier duda o consulta podéis escribirnos a confocal-cbm@listas.csic.es. (01/06/2020)

El Servicio de Microscopía óptica y confocal (SMOC) se ocupa desde 1999 del mantenimiento y la gestión de uso del equipamiento común de microscopía óptica avanzada del CBMSO. Ofrece también soporte, asesoramiento y formación en técnicas de microscopía óptica y análisis de imagen, distribuye reactivos y materiales relacionados con la microscopía, y se encarga de buscar recursos para adquirir equipamiento que se adecúe a las demandas de los investigadores del CBM.

El SMOC, como servicio científico central del Centro de Biología Molecular "Severo Ochoa", no desarrolla ninguna labor de investigación científica y ofrece:

  • Equipamiento compuesto por 7 sistemas de microscopía confocal y 6 microscopios de campo ancho, con distintos niveles de automatización, que permiten realizar estudios en muestras vivas y fijadas. Además, dispone de 2 estaciones de trabajo para análisis de imagen, un vibrátomo y un estereomicroscopio.
  • Un sistema on-line de acceso y gestión de las reservas de los equipos y su facturación.
  • Un stock de reactivos y materiales relacionados con la microscopía
  • Un sistema de Garantía de la Calidad desde marzo de 2009, actualmente con Certificación AENOR en la Norma ISO 9001-2015.

El SMOC:

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* Para llamadas desde el exterior a la extension xxxx se debe marcar: 34 91196xxxx
Apellidos Nombre Laboratorio Ext.* Horario e-mail Categoría profesional
Calvo Cazalilla Elena 310 4643 9:00 - 16:30 elena.calvo@cbm.csic.es Tco. Sup.Investig. y Laboratorio, GP3
Gallego García Carlos 310 4643 8:00 - 15:30 cgallego(at)cbm.csic.es Tit.Sup.Activ.Técn.y Profes. GP1
Muñoz Alcalá Mª Angeles 310 4643/4613 9:00 - 16:30 mamunoz(at)cbm.csic.es E.Ayudantes De Invest. De Los Oo.Publicos De Investigacion
Sánchez Jiménez Carmen 310 4643 9:30-17:00 csjimenez(at)cbm.csic.es Titulado Sup.de Actividades Técn. y Profes. GP1
Vega Sabugo Francisco José 310 4643 9:30 - 17:00 fjvega(at)cbm.csic.es Titulado Sup. Actividades Tecn. y Prof.GP1
Villalba Villacorta María Teresa 310 4643 8:00 - 15:30 tvillalba(at)cbm.csic.es Ayudante Investigación
Microscopios Widefield
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Cámara sCMOS-monocroma

Ubicación: 3ª Planta (Lab. 310)

Sistema in vivo compuesto por microscopio invertido Axiovert200 (Zeiss) acoplado a una cámara sCMOS monocroma

Reservar

Características Técnicas

MANUAL DE USO (Disponible en "Documents" del sistema de Reservas)

Calibrar Imágenes: Relación tamaño pixel/µ

Deconvolución: Valores necesarios para una correcta adquisición

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F.R.E.T
 

Ubicación: 3ª Planta (Lab. 310)

Equipo FRET in vivo compuesto por microscopio invertido Axiovert200 (Zeiss) acoplado a una cámara ccd monocroma y cambio ultrarrápido de filtros

Reservar

Características Técnicas

MANUAL DE USO (Disponible en "Documents" del sistema de Reservas)

Calibrar Imágenes: Relación tamaño pixel/µ

Deconvolución: Valores necesarios para una correcta adquisición

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Cámara CMOS-color
 

Ubicación: 3ª Planta (Lab. 335)

Microscopio vertical Axioskop2 plus (Zeiss) acoplado a cámara DMC6200 (Leica)

Reservar

Características Técnicas

MANUAL DE USO (Disponible en "Documents" del sistema de Reservas)

Calibrar Imágenes: Relación tamaño pixel/µ

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Cámara CoolSNAPfx - monocroma

Ubicación: 3ª Planta (Lab. 335)

Microscopio vertical Axio Imager M1 (Zeiss) acoplado a cámara ccd Coolsnap FX monocroma

Reservar

Características Técnicas

MANUAL DE USO (Disponible en "Documents" del sistema de Reservas)

Calibrar Imágenes: Relación tamaño pixel/µ

 
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Reactivos disponibles en el Servicio de Microscopía Confocal
Recomendaciones generales
Fluoróforos y proteínas fluorescentes
  • Es conveniente consultar los patrones de excitación y emisión de los fluoróforos y proteínas fluorescentes con el fin de optimizar el método de adquisición.
  • Cuando uséis una proteína fluorescente (FP) por primera vez conviene comprobar su espectro de emisión, por detección espectral, para garantizar la identidad de la proteína.
  • Si se usa la línea 405 nm en muestras que contengan una FP, conviene descartar problemas de fotoconversión (cambio de los perfiles de emisión).

Servicio de Microscopía Optica y Confocal (Lab.310)

Centro de Biología Molecular "Severo Ochoa" (CSIC-UAM)

C/Nicolás Cabrera,1

Universidad Autónoma de Madrid. Cantoblanco.

28049. Madrid

Teléfonos:

Despacho: 91 196 4613

Laboratorio 310: 91 196 4643

Laboratorio 336: 91 196 4660

Fax. 91 196 4420

E-mail: confocal-cbm@listas.csic.es

SMOC en 3 plantab 1

Transporte en la Comunidad de Madrid

Transporte en la U. Autónoma de Madrid

RENFE

Líneas C7, C8 y C10 de Cercanías: Parla-Atocha-Chamartín-Cantoblanco-Alcobendas/S.S. de los Reyes o Colmenar Viejo.

Estación de Cantoblanco.

AUTOBUSES INTERURBANOS

Líneas 714, 827, 827B y 828

METRO DE MADRID Y LÍNEAS DE AUTOBUSES EMT

Protocolos
Autofluorescencia
Métodos para eliminar la autofluorescencia
  • Borohidruro sódico
    • Tratar los cubres fijados con NaBH4 (1 mg/ml en PBS pH 8.0) durante 10 minutos a temperatura ambiente
    • Lavar con PBS y proseguir con el protocolo usual de inmuofluorescencia. Esta solución debe estar recién preparada, observándose la formación de burbujas.

  • Toluidine blue
    En caso de que sea el FITC el método de detección y fundamentalmente para tejidos:
    • Incubar el tejido en 0.1% Toluidine Blue (Sakai, 1973. Stain Technology 48: 247-249) desde varias horas hasta toda la noche
    • Lavar el exceso de solución. Esto disminuirá la autofluorescencia debida principalmente a la clorofila y a las paredes celulares (elastina/colágeno esencialmente)

  • Cloruro amónico
    • Tratar los cubres fijados con NH4Cl (50mM diluído en PBS pH 8.0) durante 10 minutos a temperatura ambiente
    • Lavar con PBS y proseguir con el protocolo usual de inmuofluorescencia

  • Sudan Black
    • Tratar los cubres después de incubar con los anticuerpos secundarios con 0.3% Sudan Black (w/v) in 70% ETOH (v/v) durante 10 minutos
    • Lavar bien con PBS y montar la preparación

  • Trypan Blue
    • Tratar los cubres después de incubar con los anticuerpos secundarios con Trypan Blue 250ug/ml, pH 4.4 en PBS durante 1 minuto
    • Lavar bien con PBS y montar la preparación
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